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标本采集和运送方法

2009-04-13

 一、标本采集

(一)血标本。

1.采集出疹后28天内病例静脉血23ml,加入到无菌试管中,标明采集日期和病例姓名、编号。

2.有条件地区可用1500rpm/20分钟离心机分离血清。如果没有离心机,在室温下凝固分离血清,或冷藏条件下放置,直到血清完全析出。

3.在无菌条件下,将血清移至外螺旋盖带垫圈的无菌管中,避免吸到红血球。

4.血清标本运送前应在28℃保存,如果7天内不能运送的,应置-20℃以下保存,避免反复冻融。全血标本不能冻结。

5.填写完整的标本送检表,送检表上要注明病例编号。

6.对出疹3天内麻疹IgM抗体阴性者,可于出疹后4-28天再采集第2份血标本。

(二)病原学标本。

采集病原学标本的要求是在暴发疫情早期,至少采集2例(<10例病例的暴发)或5例(≥10例病例的暴发)新发病例的病原学标本。

1.鼻咽拭子标本

1)采集出疹前5天至出疹后5天的鼻咽拭子标本。

2)使用的棉拭子和试管等应灭菌。

3)用无菌棉拭子适度用力在鼻咽部和咽喉部擦拭,获得上皮细胞。

4)把拭子放入有外螺旋盖并装有2ml病毒运输液的冻存管中。

5)病毒运输液有商业成品可用。常用的病毒运输液包括:

pH 7.47.6Hanks液:在90ml蒸馏水中加入10mlHanks然后加入10ml牛血清和0.2ml 0.4%酚红溶液,过滤消毒。加1ml/链霉素溶液。分装到无菌管中,于4℃储存备用。

组织培养液:DMEM液加入青/链霉素使其终末浓度分别为5001000IU/ml5001000ug/ml,加入胎牛血清使其终末浓度为2%,加入谷氨酰胺至浓度为1%;加入7.5%的NaHCO3调节pH7.47.6

2.尿标本

1)采集出疹前5天至出疹后5天内的尿标本1050 ml。尿液应收集在灭菌容器中,28℃保存。

2)尿中的脱落上皮细胞含有麻疹病毒,通常应在24小时内离心。4℃,转速500g(约1500 rpm),离心5分钟。

3)弃上清,并用23ml病毒运输液悬浮沉淀,置于有外螺旋盖的冻存管中。

4)在离心悬浮沉淀前不要冷冻尿液。

二、标本运送

(一)血标本。

1.标本采集后应在48小时内送到实验室,严防标本污染或容器渗漏。标本标签应清晰、防水。

2.标本运送时附带标本送检表,送检表上要注明病例编号。安排运送日期并通知实验室,说明标本送达时间。

(二)病原学标本。

1.鼻咽拭子、尿液等病原学标本采集后应立即置28℃保存。尿液离心后重悬的沉淀可在28℃保存。

2. 病原学标本应尽快送达省级麻疹实验室。48小时内能送达的,可在28℃保存,否则-70℃保存。无-70℃保存条件者,可在-20℃保存,但要在1周内送达。在-70℃条件下保存的标本,1个月内送达省级麻疹实验室。

3.标本应在28℃运输,严防标本污染或容器渗漏。

4.标本保存和运送过程应避免日光照射。

5.其他送检要求与血清标本相同。


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